Co-Culture

Copenhagen Fertility Center udfører nu rutinemæssigt co-culture

Hvad er Co-culture?

Co-culture er en hjælp til menneskelige æg under deres dyrkning i laboratoriet.

Vi har siden 1980 vidst, at de dyrkningsmedier, man anvender selv i dag til IVF behandling, ikke altid tilbyder det bedste miljø for æggene under deres ophold uden for kvindens krop. Det har vist sig, at dyrker man æggene sammen med celler fra kvindens egen livmoder, får de det bedre og har større mulighed for at ende med en graviditet. Ordet Co-culture skal således forstås som en samdyrkning af æggene og kvindens livmoderceller.

Rent praktisk foregår det på den måde, at man på dag 5-7 i den menstruationscyklus, hvor kvinden er i behandling for IVF, tager en lille prøve fra livmoderslimhinden (priming). Disse celler har vi mere end 30 års erfaring med at dyrke i de små skåle, som senere også skal anvendes til dyrkning af kvindens æg ved IVF behandlingen.

En fordel ved co- culture er også at denne priming i sig selv er med til at forbedre implantationen af ægget i kvindens livmoderslimhinde.

I flere videnskabelige undersøgelser har man vist, at æg dyrket sammen med kvindens livmoderceller har det bedre og opnår en bedre kvalitet. Man har således set bedre graviditetsresultater, specielt hos de kvinder, der har været mange IVF forsøg igennem og hos kvinder med gentagne biokemiske graviditeter, der ender i aborter.

Er Co-culture farligt?

Nej, selve prøven fra livmoderslimhinden tages med et lille kateter og anvendes også ved rutine undersøgelser af livmoderen, og ved det vi kalder priming. Cellerne dyrkes i samme rene dyrkningssystemer, som vi anvender ved IVF behandlingen, og det er jo kvindens egne celler vi anvender, så der er ingen smitte risiko.

Hvordan foregår Co-culture helt præcist?

Kvinden starter sin IVF behandling (ofte hos os den korte behandling) med skanning på 3.cyklusdag. Her får hun så udleveret medicin og starter IVF behandingen. Allerede på hendes 5. cyklusdag kommer hun tilbage, og vi udtager en prøve fra livmoderen. Dette foregår i lokalbedøvelse og er ikke en smertefuld begivenhed. Lige efter kan der være en lille blødning, men det stopper efter 12 timer.

Cellerne bliver så dyrket frem i de små skåle og er klar, når kvinden senere i samme behandling skal have sine æg taget ud. Her foregår alt som beskrevet i vore IVF protokol. Æggene vil ofte blive dyrket til blastocyst i co-culture, da netop co-culture forbedrer blastocyst dykningerne.



Her vises en blastocyst 5 dage efter æg udtagningen og befrugtningen i Co-culture. Man kan lige se en meget tynd æggeskal og mange sunde celler i blastocysten.



Et billed af en blastocyst, som fokuserer på de celler, der udgør de første moderkageceller (Trophoectoderm) . Det fantastiske her er, at man kan se cellerne med flotte kerner og aktivt cytoplasma ( små vesikler i cellen).



Her ses en anden blastocyst i co culture. Her ser man små celledele ( vesikler) rundt om blastocysten, som illustrerer den sunde blastocyst, der sender signaler ud til omgivelserne.


Referencer

Lindenberg S, Hyttel P, Sjogren A. A comparative study of attachment of human, bovine, and mouse blastocysts to uterine epithelial monolayer. Hum Reprod 1989; 4:446-456.
Embryologic outcome and secretome profile of implanted blastocysts obtained after coculture in human endometrial epithelial cells versus the sequential system
Francisco Dominguez, Blanca Gadea, Amparo Mercader, Francisco J. Esteban, Antonio Pellicer, Carlos Simón

Fertility and sterility 1 February 2010 (volume 93 issue 3 Pages 774-782.e1 DOI: 10.1016/j.fertnstert.2008.10.019)

Beneficial effect of autologous endometrial cell coculture in patients with repeated implantation failure Victoria Eyheremendy, Fernanda G.E. Raffo, Mercedes Papayannis, Julia Barnes, Cintia Granados, Jorge Blaquier

Fertility and sterility 1 February 2010 (volume 93 issue 3 Pages 769-773 DOI: 10.1016/j.fertnstert.2008.10.060)

Bongso A, Ng SC, Fong C-Y, Ratman S. Co cultures: a lead in embryo quality improvement for assisted reproduction. Fertil Steril. 1991;67:120–122
Barmat LI, Liu HC, Spandorfer SD, Veek l, Damario M, Rosenwaks Z. Human preembryo development on autologous endometrial coculture versus conventional medium. Fertil Steril. 1998;70:1109–1113
Menezo Y, Hazout A, Dumont M, Herbaut A, Nicollet B. Coculture of embryos on Vero cells and transfer of blastocysts in human. Hum Reprod. 1992;7(Suppl 1):101–106
Jayot S, Parneix I, Verdaguer S. Coculture of embryos on homologous endometrial cells in patient with repeated failures of implantation. Fertil Steril. 1995;63:109–114
Barmat LI, Liu HC, Spandorfer SD. Autologous endometrial co-culture in patients with repeated failures of implantation after in vitro fertilization-embryo transfer. J Assist Reprod Genet. 1999;16:121–127
Rubio C, Simon C, Mercader A. Clinical experience employing co-culture of human embryos with autologous human endometrial epithelial cells. Hum Reprod. 2000;15(Suppl 6):31–38
Mercader A, Garcia-Velazco J, Escudero E, Remohi J, Pellicer A, Simon C. Clinical experience and perinatal outcome of blastocyst transfer after coculture of human embryos with human endometrial epithelial cells. Fertil Steril. 2003;80:1162–1168
Spandorfer SD, Pascal P, Parks J, Clark R, Veeck L, Davis OK, et al. Autologous endometrial co-culture in patients with IVF failures: outcome of the first 1030 cases. J Reprod Med. 2004;49:463–467
Spandorfer S, Park J, Davis O, Clarke R, Rosenwaks Z. A case controlled study evaluating autologous endometrial coculture (AECC) as an effective tool for young patients (age under 36 years) with multiple failed IVF attempts and diminished ovarian reserve. Fertil Steril. 2007;88(Suppl 1):O-275
Barash A, Dekel N, Fieldust S, Segal Ll, Schechtman E, Garanot I. Local injury to the endometrium doubles the incidence of successful pregnancies in patient undergoing in vitro fertilization. Fertil Steril. 2003;79:1317–1322
Menezo Y, Guerin J, Czyba J. Improvement of early human embryo development in vitro by coculture on monolayers of Vero cells. Biol Reprod. 1990;42:301–306
Nieto F, Watkins W, Lopata A, Baker G, Edgar D. The effect of coculture with autologous cryopreserved endometrial cells on human in vitro fertilization and early embryo morphology: a randomized study. J Assist Reprod Genet. 1996;13:386–389
Simon C, Pellicer A. Interleukin-1 system crosstalk between embryo and endometrium in implantation. Hum Reprod. 1995;10(Suppl 1):11
Spandorfer SD, Barnat LI, Liu HC, Mele C, Veeck L, Rosenwaks Z. Granulocyte macrophage stimulating factor production by autologous endometrial co-culture is associated with outcome for IVF patient with a history of multiple implantation failures. Am J Reprod Immunol. 1998;40:377–381
Spandorfer SD, Neuer A, Liu HC, Bivis L, Clarke R, Veeck L, et al. Interleukin-1 levels in the supernatant of conditioned media of embryos grown in autologous endometrial co-culture: correlation with embryonic development and outcome for patient with a history of multiple implantation failures. Am J Reprod Immunol. 2000;42:6–11
Spandorfer SD, Navarro J, Levy D, Black AQR, Liu HC, Veeck L, et al. Autologous endometrial co-culture in patient with IVF failures: correlation of outcome with leukemia inhibiting factor (LIF) production. Am J Reprod Immunol. 2001;46:375–380
Bendikson K, Park J, Rosenwaks Z, Spandorfer S. Do cytokine levels in the supernatant from conditioned media of embryos grown in autologous endometrial coculture correlate with pregnancy outcomes after in vitro fertilization?. Fertil Steril. 2007;(Supp 1):88;O-152
Barmat LI, Liu HC, Spandorfer SD, Veek L, Damario M, Rosenwaks Z. Importance of the biopsy date in autologous endometrial cocultures for patients with multiple implantation failures. Fertil Steril. 2002;77:1209–1213Arnold JT, Kaufman DG, Seppala M, Lessey BA. Endometrial stromal cells regulate epithelial cell growth in vitro: a new co-culture model. Hum Reprod. 2001;16:836–845
Simon C, Mercader A, Garcia-Velasco J, Nikas G, Moreno C, Remohi J, et al. Coculture of human embryos with autologous human endometrial epithelial cells in patients with implantation failure. J Clin Endocrinol Metab. 1999;84:2638–2646
Mercader A, Garcia-Velasco JA, Escudero E, Remohi J, Pellicer A, Simon C. Clinical experience and perinatal outcome of blastocyst transfer after coculture of human embryos with human endometrial epithelial cells: a 5-year follow-up study. Fertil Steril. 2003;80:1162–1168
Simón C, Gimeno MJ, Mercader A, O'Connor JE, Remohí J, Polan ML, et al. Embryonic regulation of integrins beta 3, alpha 4, and alpha 1 in human endometrial epithelial cells in vitro. J Clin Endocrinol Metab. 1997;82:2607–2616
Simón C, Mercader A, Garcia-Velasco J, Nikas G, Moreno C, Remohí J, et al. Coculture of human embryos with autologous human endometrial epithelial cells in patients with implantation failure. J Clin Endocrinol Metab. 1999;84:2638–2646